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在ELISA試劑盒中一般有兩次抗原抗體反應(yīng)

ELISA試劑盒的應(yīng)按規(guī)則力求準(zhǔn)確在ELISA試劑盒中一般有兩次抗原抗體反應(yīng)，即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后?？乖贵w反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時間，這一保溫過程稱為溫育(incubation)，有人稱之為孵育，在試劑盒中似不恰當(dāng)。ELISA試劑盒屬固相免疫測定，抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例，加入板孔中的標(biāo)本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會，只有z貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐步平衡的過程，因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的...

ELISA試劑盒測定中有哪些影響因素？

ELISA試劑盒即酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，是一種常用的固相酶免疫測定方法。由于ELISA方法靈敏，特異性強(qiáng)不需要特殊設(shè)備，所以被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在臨床檢驗(yàn)中除正常反應(yīng)外，有時?？梢姷揭恍╁e誤結(jié)果(即假陽性或假陰性);在此為大家解讀下ELISA試劑盒檢測受影響因素中標(biāo)本的影響。溶血標(biāo)本及混有紅細(xì)胞的血清采用ELISA法檢測易產(chǎn)生假陽性?？赡苁侨苎逯泻羞^氧化酶物質(zhì)(紅細(xì)胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素)，在洗滌...

ELISA試劑盒特異性是以交叉反應(yīng)率來標(biāo)明的

ELISA試劑盒途徑的選擇決定于抗原的生物學(xué)特性和理化特性，如激素、酶、毒素等生物學(xué)活性抗原，通常不宜選用靜脈打針。不一樣個別對共同抗原的反應(yīng)性不一樣，而且不一樣抗原發(fā)作免疫反應(yīng)的能力也有強(qiáng)有弱，因此常常在打針抗原的一起，參與能增強(qiáng)抗原的抗原性物質(zhì)，以影響機(jī)體發(fā)作較強(qiáng)的免疫反應(yīng)，這種物質(zhì)稱為免疫佐劑。免疫前取等容積*或不*佐劑與免疫原溶液混合，用振蕩器混勻成乳狀，也可以在免疫前取需求量佐劑置乳缽中研磨，均勻后再邊磨邊滴參與等容積抗原液(其中加卡介苗3～4mg/ml或不加)，加...

ELISA試劑盒抗體反應(yīng)使抗原固相化

ELISA試劑盒因此含雜質(zhì)較多的抗原也可選用捕獲包被法,試驗(yàn)的特異性、敏感性均由此得以改善，重復(fù)性亦佳。蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附聯(lián)絡(luò)的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的效果于?？蓪⒕郾揭蚁┌逑冉?jīng)紫外線照射(例如30W紫外燈，75cm照射12小時)，以增加其吸附功能。例如，在檢查抗DNA抗體時，需用DNA作為包被抗原，ELISA試劑盒而廣泛的固相載體一般不能直接與核酸聯(lián)絡(luò)。換言之，包被就是抗原或抗體聯(lián)絡(luò)到固相載體表面的進(jìn)程。當(dāng)抗原決定簇...

ELISA試劑盒是免疫酶技術(shù)的一種

ELISA試劑盒是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。免疫酶技術(shù)是將酶標(biāo)記在抗體/抗原分子上，形成酶標(biāo)抗體/酶標(biāo)抗原，稱為酶結(jié)合物。該酶結(jié)合物的酶在免疫反應(yīng)后，作用于底物使之呈色，根據(jù)顏色的有無和深淺，定位或定量抗原/抗體。ELISA試劑盒是免疫酶技術(shù)的一種，其特點(diǎn)是利用聚苯乙烯微量反應(yīng)板(或球)吸附抗原/抗體，使之固相化，免疫反應(yīng)和酶促反應(yīng)都在其中進(jìn)行。在每次反應(yīng)后都要反復(fù)洗滌，這既保證了反應(yīng)的定量關(guān)系，也避...

如何挑選適合自己的ELISA試劑盒？

目前市場上的ELISA試劑盒質(zhì)量參差不齊，如何去挑選適合自己的試劑盒就顯得特別重要，具體有以下幾點(diǎn)可供參考：一、特異性ELISA試劑盒的特異性與試劑盒的關(guān)鍵組分，抗體對有關(guān)，若抗體對中之一為多抗，另一個必須為單抗，建議使用雙單抗。二、靈敏度靈敏度反映的是試劑盒檢出被檢物質(zhì)的量的能力，用戶可根據(jù)自己樣本中待檢指標(biāo)的量選擇合適的試劑盒，如果待檢指標(biāo)量很低，一般的試劑盒不能滿足要求，可選擇高敏的ELISA試劑盒。三、重復(fù)性科學(xué)實(shí)驗(yàn)講求重復(fù)性，一般ELISA試劑盒，其板內(nèi)和板間變異系...

雞磷（P）ELISA試劑盒操作說明

雞磷（P）ELISA試劑盒操作說明雞磷（P）ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理雞磷（P）ELISA試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被雞磷（P）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的雞磷（P）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。樣本處理及要求1.血清：將收集于血清分離管...

大鼠1,4,5-三磷酸肌醇（IP3）ELISA試劑盒課題研究

大鼠1,4,5-三磷酸肌醇（IP3）ELISA試劑盒大鼠1,4,5-三磷酸肌醇（IP3）ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理大鼠1,4,5-三磷酸肌醇（IP3）ELISA試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被大鼠1,4,5-三磷酸肌醇（IP3）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠1,4,5-三磷酸肌醇（...